牛的人工授精技术分:冷冻颗粒精液制作工艺(引进良种公牛→采精→制成颗粒冻精→利用液氮在零下196℃的条件下保存)和人工授精操作流程(准备工作→保定母牛作发情鉴定→器械消毒→利用2.9%柠檬酸钠液解冻精液→镜检活力达0.35以上→对发情适期母牛输精)两个部分。 (一)精液的解冻:冷冻精液使用前必须使用解冻液解冻,方能进行人工授精。 1.解冻液配制:解冻液一般使用2.9%的柠檬酸钠溶液和维生素B12(2毫升1支)。解冻液配制必须准确,浓度不可偏高偏低,pH为6,宜现配现用,也可用安瓶分装备用。 维生素B12注意避光保存,防止购进伪劣产品,解冻时防止生水滴入。 2.解冻方法:解冻时先把解冻液倒入小玻璃瓶内,每输精1头母牛用解冻液1.5~2毫升,把装好解冻液的玻璃瓶(安瓶)放在40℃的温水中预热,再将颗粒冻精2粒迅速投入小玻璃瓶中,并不断地轻轻摇动,待颗粒精液快融化完时立即将小璃玻瓶在温水中取出,继续摇动使其全部融化,再进行镜检,观察活力,如活力不低于35%,便可用来输精。解冻后的精液存放时间不超过1小时。 (二)精力活力的检查方法:取一点精液,滴在载玻片上,加上洁净的盖玻片,使载玻片和盖玻片之间充满精液,避免空气泡藏在里面,然后放在显微镜下放大400倍,观察精液中前进运动的精子数量,来评定精子活力的等级。评定时一般分为十级:在显微镜下100%的精子都是直线前进运动的可以评1.0级,90%直线前进运动的0.9级,其余依次类推。颗粒冻精解冻后活力达0.35以上方可用。精子活力检查时,必须在37~38℃的环境中进行,冬季必须使用保温箱,温度保持38~40℃,才能使检查获得准确的结果。 (三)发情鉴定:母牛的发情鉴定方法,常用的有以下几种: 1.外部观察法:主要是根据母牛的外部和精神状态来判断发情的状况。母牛发情时,表现兴奋不安、鸣叫、游走、啃草减少,尾根举起,频频排尿,追逐和爬跨其他母牛并接受其他母牛爬跨,母水牛发情特征不如黄牛强烈明显,表现不规律,虽然也比平时兴奋、敏感和不安,但不鸣叫,有时发出“屹屹”叫声,在夜间,也不太爬跨其他母牛,在栏内常站在一角,注意外界动静,放牧时常抬头张望,不太爱吃草。检查发情母牛的外阴部,可见外阴唇水肿,柔软而松驰,原有细小皱纹消失,黏膜红润,阴门口多开,并出现阴道腔,在尾上端阴门附近可看到黏液的分泌物的结块,或有透明黏液自阴门流出。 2.阴道检查法:用阴道开张器观察阴道的黏膜、分泌物和子宫颈口的变化来判断母牛的发情状况。不发情的母牛阴道黏膜苍白、干燥、子宫颈外口关闭干燥、紧缩成菊花。若母牛的阴道内有黏液,阴道黏膜光亮、充血、红润、子宫颈外口出现凸、开、红、湿润便是发情。 发情开始时,阴唇、阴道及子宫颈外口等部位充血肿胀度轻微,黏膜颜色较淡,以后随着发情的进展和性欲旺盛,充血肿胀度更甚,颜色渐深,发情末尾时,充血肿胀度又随之减退,最后完全消失,恢复正常状态。子宫颈外口的开张度,也随着发情的进展,由微开到开张,最后又逐渐缩小乃至关闭。发情开始时,黏液量少,呈透明如水样,稀薄无牵缕性,黏性不强,至发情旺盛期,黏液量增多,颜色为透明或半透明时,牵缕性很强,呈玻璃棒状较稠,转入发情末期,黏液量又减少,颜色半透明,混浊或乳白色,黏性差成糊状。 3.直肠检查法:主要是检查卵巢的卵泡发育情况。卵泡的发育随着母牛的发情变化分四个时期,即:弹泡期→软泡期(卵泡成熟、泡壁很薄、柔软、波动明显呈圆形或卵圆型)→软皮期。 具体操作:术者剪短指甲,用水润滑手,手臂插入直肠,尽掏宿粪,然后顺着直肠底部用指肚探摸全部卵巢,或按子宫颈、子宫体、子宫角、卵巢次序探摸。找到卵巢用食、中指抓住卵巢系膜,并将该两指稍微弯曲,固定住卵巢,然后用母指探摸,必须做到小心、细致、轻,试探卵巢大小、形状、轻硬程度、表现凹凸及卵泡发育状况,用脑记忆,并进行登记。母牛发情后,有卵泡发育的,最好每隔12小时检查1次。
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